Какво представлява тестът за ендотоксини?

Какво представлява тестът за ендотоксини?

Ендотоксините са хидрофобни молекули, които са част от липополизахаридния комплекс, който образува по-голямата част от външната мембрана на грам-отрицателните бактерии.Те се освобождават, когато бактериите умрат и външните им мембрани се разпадат.Ендотоксините се считат за основни фактори, допринасящи за пирогенния отговор.А парентералните продукти, замърсени с пирогени, могат да доведат до развитие на треска, предизвикване на възпалителен отговор, шок, органна недостатъчност и смърт при хората.

Тестът за ендотоксини е тест за откриване или количествено определяне на ендотоксини от грам-отрицателни бактерии.

Първоначално за откриване и количествено определяне на ендотоксини във фармацевтичните продукти се използват зайци.Според USP, RPT включва наблюдение за повишаване на температурата или треска след интравенозно инжектиране на фармацевтичния продукт на зайци.И 21 CFR 610.13(b) изисква тест за пироген при зайци за определени биологични продукти.

През 60-те години на миналия век Фредрик Банг и Джак Левин откриват, че амебоцитите на подковообразния рак се съсирват в присъствието на ендотоксини.TheLimulus Amebocyte Lysate(или Tachypleus Amebocyte Lysate) е разработен съответно, за да замени повечето RPT.В USP LAL тестът се нарича тест за бактериален ендотоксин (BET).И BET може да се направи с помощта на 3 техники: 1) техниката на гел-съсирек;2) турбидиметричната техника;3) хромогенната техника.Изискванията за LAL теста включват оптимално pH, йонна сила, температура и време на инкубация.

В сравнение с RPT, BET е бърз и ефективен.BET обаче не може да замени напълно RPT.Тъй като LAL анализът може да бъде повлиян от фактори и той не е в състояние да открие неендотоксинови пирогени.