Приложение на хромогенна техника към теста за бактериални ендотоксини

Хромогенната техника е сред трите техники, които също съдържат техника на гел-съсирек и турбидиметрична техника за откриване или количествено определяне на ендотоксини от Грам-отрицателни бактерии чрез използване на амебоцитен лизат, извлечен от синята кръв на подковонос (Limulus polyphemus или Tachypleus tridentatus).Може да се класифицира като хромогенен анализ на крайна точка или кинетично-хромогенен анализ въз основа на конкретния използван принцип на анализ.

Принципът на реакцията е следният: амебоцитният лизат съдържа каскада от серинови протеазни ензими (проензими), които могат да бъдат активирани от бактериални ендотоксини.Ендотоксините активират проензимите, за да произведат активирани ензими (наречени коагулаза), последният катализира разделянето на безцветния субстрат, освобождавайки жълто оцветен продукт pNA.Освободената pNA може да бъде измерена фотометрично при 405 nm.И абсорбцията е в положителна корелация с концентрацията на ендотоксин, тогава концентрацията на ендотоксин може да бъде съответно количествено определена.


Време на публикуване: 29 септември 2019 г